化妝品防腐效能試驗檢測——ASTM法

2017-01-18 10:35:19 天緯化學

ASTM法這種方法主要應用于對經防腐和未經防腐樣品的比較檢驗。ASTM提供了一系列可使用的微生物。這種方法使用的細菌保存在營養瓊脂培養基上，酵母菌和絲狀真菌保存在Mycophil瓊脂培養基上，培養溫度分別為32℃和25℃，菌種每月轉接一次。試驗所使用的菌體必須是新鮮的，即細菌在適當的培養基上于37℃培養24h-48h，酵母在25℃下培養48h，絲狀真菌在25℃下培養7天-14天（至產生池子）。這種方法要求在接種細菌時用無菌接種環將微生物轉移到無菌蒸餾水中，在425nm下控制濃度為1×10的8次方細菌mll。在接種霉菌時，用接種環或無菌玻璃棒輕輕接觸霉菌培養物將孢子取出，然后用無菌的不吸水的棉花過濾除去菌絲體，并打散抱子，再用血球計數器控制孢子在1×10的７次方個ml的水平。ASTM方法取樣時將待測樣品以100g為一份，取3份裝入帶有玻璃珠的容器中。每份樣品加入lm的微生物懸浮液（菌液的最終濃度為1×10的6次方細菌ml或1×10的8次方酵母ml，混合后的樣品于室溫下保存，在適當的時間（0，7，14，28天）取一份混合樣與9份Letheeb肉湯混合，采用10倍稀釋溶液，傾注法進行菌落計數，培養時間和溫度同前，最后以第一平板上的菌落數，得到每克檢驗產品的存活的微生物數目。有時化妝品會反復受到暴露或污染。在這種情況下，ASTM方法建議在28天后再進行防腐試驗，這種重復檢驗，可以對消費者使用過程中產品污染的潛在問題作出更好的預測。例如，它對確定手和身體用清洗液的污染和頻繁使用的睫毛膏的污染都很重要。重復防腐性檢驗或再培養可以顯示某種特定產品的防腐系統失效前，產品能經受住多大的損害。

ASTM要求G-和G+細菌和酵母菌，在防腐性檢驗后7天內至少降低99.9%。本試驗的后期微生物不應有什么增長，真菌在28天內應降低90&，并且試驗期間不應該出現增長現象，未經防腐的樣品在這兩項指標方面都不合格。ASTM是通過在平板上觀察被測菌有無生長的現象，來檢驗培養基對防腐劑的中和效果的。具體做法是：用經混合接種的營養肉湯的培養物以10的-1次方、10的-2次方和10的-3次方的菌濃度進行平板劃線。這種混合接種物可以是G-、G+及酵母，或是絲狀真菌混合物，在32℃培養18h--24h，或25℃培養72h后無生長的現象就表明沒有對殺菌劑起中和作用。

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