體外診斷試劑中不同靈敏度的檢測方法確定

2022-02-11 09:58:56 天緯化學小編 411

空白限值的一般方法為：對于一個給定的檢測方法，開發或制造商測定后給出一系列空白樣本的結果和一系列低濃度樣本的結果。空白樣品的測定用于提供一個閾值，從而可以判斷在測定結果比閾值高的樣本中含有分析物。對于空白檢測值對稱分布的情況。可通過檢測一定數量的陰性樣品或正常樣品，樣品的數量要根據樣品的離散情況來定，計算樣品的均值及標準差，均值加上2個標準差即為空白限值，即在空白限值以上的樣品有95％的可能為真陽性。

檢測方法常以用零濃度校準品或樣本稀釋液作為樣本，重復測定20次，計算20次測量結果RLU(相對發光值)的平均值(M)和標準差(SD)，得出M+2SD的RLU值。然后再轉換成濃度單位。對于檢測值小于零不報道或非對稱分布的空白值(非高斯分布的空白值)。95％分位值必須用其他方法。最直接的方法是應用統計原理基于值大小排列，95％百分位數可估計為空白限值。要確定檢出限必須考慮尋找一個檢測結果有特定概率的可能性超過空白限值的最小濃度樣本，如檢測結果95％的可能性超過空白限值。

在實際工作中應采用考察空白限值的同時進行多份低濃度樣本的檢測，計算低濃度樣本的總標準偏差，根據公式LOD=LOB+cBSD計算檢出限，其中LOD為檢出限、LOB為空白限值、CB為校正因子、SD為低濃度樣本的總標準偏差。在驗證檢}乜限時采用的方法為檢測含有標示檢出限量值濃度的樣本，計算檢測結果超出空白限值的比例。定量限確定的方法和檢出限類似，驗證方法也類似。在定性試驗中進行臨界值的確定有許多種方法。如以陰性對照均值加上兩倍或三倍標準偏差作為臨界值、以百分位數法單側95％或99％來確定臨界值、使用ROC曲線設定臨界值等。臨界值的驗證可以通過制備在臨界值上下20％左右濃度的樣本進行。

一般來說，臨界值上下20％左右為95％區間。可以進行重復檢測，看檢測結果是否滿足95％的陰性和95％的陽性，從而判斷臨界值的確定是否合適。美國國家臨床標準研究院(CLSI)發布了EP一17的標準化文件。該文件提出空白限值(LOB)、檢H；限(LOD)以及定量限(LOQ)的定義和實驗方案。